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抑菌圈實(shí)驗(yàn)用具和材料、試驗(yàn)過(guò)程

更新時(shí)間:2021-10-18      點(diǎn)擊次數(shù):1306
   抑菌圈常用于抗生素產(chǎn)生菌的分離篩選。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被檢菌能分泌某些抑制工具菌生長(zhǎng)的物質(zhì),如抗生素等,便會(huì)在該菌落周?chē)纬晒ぞ呔荒苌L(zhǎng),很容易被鑒別出來(lái)。
  
  一、實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:
  抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式,主要用于測(cè)定殺菌防霉劑對(duì)細(xì)菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通過(guò)殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴(kuò)散能力來(lái)初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。
  
  二、用具和材料:
  霉菌培養(yǎng)皿,無(wú)菌吸管(或針筒),圓片濾紙(直徑50px),帶玻璃珠的無(wú)菌水,帶過(guò)濾漏斗的三角牌,鑷子,接種針(環(huán)),熔化狀態(tài)的瓊脂培養(yǎng)基(最好保溫于45℃左右水浴中),一定濃度的藥劑,供試驗(yàn)用的菌種。
  
  三、試驗(yàn)過(guò)程:
  1.用接種環(huán)挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無(wú)菌水中,用手振蕩數(shù)分鐘使孢子分散,過(guò)濾后制成混合孢子懸液。
  2.用無(wú)菌吸管(或針筒)向各培養(yǎng)皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。
  3.向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基(約45℃),將菌液與培養(yǎng)基混合均勻,待其冷卻。
  4.用鑷子將圓片濾紙?jiān)诓煌瑵舛鹊姆烂箘┲薪n片刻,取出置于帶菌培養(yǎng)基平板的中央,蓋上蓋子
  5.置適宜溫度下,培養(yǎng)2~3d,觀察濾紙片圓片周?chē)挠袩o(wú)及大小。
  
  四、注意事項(xiàng):
  1.所有的操作用具和材料都要事先做滅菌處理,操作必須在無(wú)菌室(或無(wú)菌箱)內(nèi)于火焰旁進(jìn)行。
  2.霉菌、細(xì)菌、酵母菌等各種微生物都必須分別配置混合菌液,即這里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等諸種菌的分別混合液,并非霉菌、細(xì)菌和酵母菌的混合液。
  3.混合菌液的濃度一般為106~108cfu/mL.
  4.倒入培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基溫度不能太高(一般為45℃左右),否則會(huì)引起微生物死亡。也不能太低,因?yàn)榄傊瑫?huì)很快凝結(jié),以致攪拌不均勻,影響試驗(yàn)結(jié)果。
  5.各種微生物的最適生長(zhǎng)溫度不同(例如霉菌一般為25~30℃,細(xì)菌一般為32~37℃等),恒溫培養(yǎng)時(shí)宜分開(kāi)放置。
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